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柱后衍生系统又添新应用--河豚毒素检测(GB 5009.206-2016)

2021-03-18

  去年游族创始人遭人投毒致死,英年早逝令人惋惜。据某些报道称其中的毒之一就是河豚毒素。像这样的河豚毒素中毒事件在日常生活中也有发生。近日,广东省卫健委通报的广东三起较大级别的食物中毒事件中,其中两起为河豚毒素中毒,且中毒两人均死亡。

什么是河豚毒素呢

  河豚毒素(tetrodotoxin,TTX),分子式为C11H17O8N3,是鲀鱼类(俗称河豚鱼)及其它生物体内含有的一种生物碱。

  河豚毒素为氨基全氢喹唑啉型化合物,是自然界中所发现的毒性最大的神经毒素之一,曾一度被认为是自然界中毒性最强的非蛋白类毒素。这种毒素主要作用于肠道,被肠道吸收后便会迅速作用于神经末梢和神经中枢,可高选择性和高亲和性地阻断神经兴奋膜上钠离子通道,阻碍神经传导,从而引起神经麻痹而致死亡。

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  据调查显示,河豚毒素大部分存在于河豚当中,但是近几年在蟾蜍、蝾螈、蓝环章鱼中也检测到河豚毒素的存在。越来越多的研究认为,河豚毒素有可能是通过食物链传播到海洋生物体内的,并不只和河豚有关。

  河豚体内的毒性在各个部位不同,甚者季节也会影响河豚体内的毒性。据研究显示,河豚在生殖季节毒性大,且雌性大于雄性,而在不同部位中,卵巢>脾脏>肝脏>血液>眼睛>鳃耙>皮肤>精巢。一般情况下,河豚的肌肉中是不含有毒素的,但河豚死后内脏中的毒素可少量地渗入肌肉中。

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  河豚毒素化学性质和热性质均很稳定,一般家庭中的烹饪条件不能将其破坏,只有在高温加热30min以上或在碱性条件下才能被分解。而能将其破坏的条件要求较高,为220℃加热20-60min。这种的毒素的发病期很短,短至10-30min,长至3-6h发病,发病急,如果抢救不及时,中毒后最快的10min内死亡,最迟4-6h死亡。中毒后也缺乏有效的解救措施。所以,对于河豚毒素的检测尤为重要。

方法介绍

  目前食品中河豚毒素的检测主要依据GB 5009.206-2016,包括小鼠生物法、液相色谱-串联质谱法、液相色谱-荧光检测法和酶联免疫吸附法。其中小鼠生物法虽为世界普遍的参考方法,但存在小鼠个体差别大导致结果异常的现象;液相色谱-串联质谱法仪器成本高,对操作人员水平要求严格;酶联免疫吸附法属于半定量方法且商品化试剂盒较少;故采用液相色谱-荧光检测法。

  为保证检测结果更加精准可靠,普瑞邦特对该方法进行优化,采用诺尔液相搭配Pribolab®MDS多功能光电衍生系统进行河豚毒素的检测。经液相色谱分离后,河豚毒素在Pribolab®MDS多功能光电衍生系统内与高温的氢氧化钠溶液反应,生成具有强荧光效应的C9碱,荧光检测定量限为300ppb,满足国标要求。

实验条件

  • 色谱柱: C 18 柱,柱长 150mm ,内径 4. 6mm ,粒径 5 μ m ,或等效柱。

  • 流动相:乙腈 - 乙酸铵缓冲液( 5+95 ,体积比)。

  • 流速: 1. 0mL / min 。

  • 柱温: 30℃ 。

  • 检测波长:激发波长 385nm ,发射

    波长 505nm 

注:如需优化后的方法,请与我们联系


谱图

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上图为1ppm河豚毒素柱后衍生产物荧光谱图

耗材加油站

产品编号/货号

名称

型号/规格

PR-185150

C18色谱柱

15cm*4.6mm*5um

IAC-M10-3

河豚毒素免疫亲和柱

25/50T

STD#M009

河豚毒素标准品

20ug/mL

EQ-EVP 3024

Pribolab®真菌毒素浓缩器

EQ-EVP24

EQ-MDS2010/2020

Pribolab®MDS多功能光电衍生系统

MDS-3000/3100

MSS3009

Pribolab®河豚毒素

1mg


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